赛分 Sepax HP-C18 液相色谱柱4.6mm×250mm

赛分 Sepax HP-C18 液相色谱柱4.6mm×250mm 简介

SRT SEC键合固定相采用表面修饰技术，通过在高纯度具有良好机械稳定性的硅胶基质上，键合一层均匀的纳米厚度中性亲水薄膜而制备得到。工艺采用可控的化学修饰技术，因此能确保柱与柱之间有着可靠的重现性。SRT填料采用化学键合技术，表面亲水涂层覆盖，因此不仅具有优异的稳定性，而且对蛋白等生物样品的非特异性吸附作用也非常小。精心设计的大孔体积可保证高的分离容量以及优异的分辨率。由于采用创新的表面化学技术，以及拥有多种孔径规格（从100Å到2000Å），SRT SEC柱可为各种分离应用提供最高分辨率和最大回收率。应用领域覆盖了大分子量的生物分子（如蛋白质、核酸）、小分子量的生物分子（如多肽、寡核苷酸）、天然聚合物（如多糖）、合成聚合物、生物细胞（如细菌和病毒）、纳米材料（如纳米颗粒）等。

特点:

● 高柱容量、高分辨率
● 宽的pH范围(pH范围2-8.5)
● 使用寿命长
● 低盐浓度洗脱，适合LC-MS分析
● 对于生物样品无强吸附
● 极低的非特异性吸附，高的蛋白回收率及活性回收率
● 解决多维色谱分析应用

赛分 Sepax HP-C18 液相色谱柱4.6mm×250mm

色谱柱的安装和操作

色谱柱在运输过程中或在没有使用时，它的两端总是用 堵头进行密封。当将色谱柱接入色谱仪器系统时，首先移去 两端的堵头。请注意将流动相流动的方向与柱上标记的方向 保持一致。除非出于特殊考虑，例如为了清除堵在色谱柱入 口端的脏污等而需要将色谱柱反接以进行冲洗时，建议用户 在接上色谱柱时一定要遵循柱上标记的方向。由于色谱柱的 连接是整个色谱操作过程的一部分，如果密封卡套过紧，或 安装不合适，或者密封卡套与色谱柱端口不匹配，都有可能 导致溶液的泄漏。请按照下面步骤将色 ，从而将色谱柱接入 HPLC 系统： (a) 第一次使用的管线，请依次将管线接头和密封卡套装在 径 1/16"的管线上。密封卡套的宽口端应朝向管线接头。 (b) 将管线紧紧插入色谱柱的接口，向前滑动密封卡套和管 线接头，并使管线接头的 ，然后拧紧管线接头。 (c) 在用力将管线压入 螺帽再进一步紧固。 ) 对色谱柱的另一端采用上述方法进行操作。 新的 Sepax AAA 柱是置于甲醇（或乙腈）水溶液中运输 的，在储存和运输过程中，硅胶填料可能会干涸。这时推荐 用 10-20 倍柱体积的纯有机溶剂如甲醇、乙腈进行冲洗以活化色谱柱。接着可用用户自己选择的流动相冲洗色谱柱。流 速由 0.1mL/min 逐渐升至所需的操作条件，直至基线稳定为 止。如果柱压和基线波动较大，这可能是气泡进入了色谱柱中这时可用较高流速冲洗色谱柱 2-5 分钟，例如对于 4.6x250 mm 的色谱柱可采用流速 1.5mL/min。

样品和流动相

为了避免色谱柱的堵塞，所有样品和溶剂，包括缓冲溶 液在内，都必须在使用前用 0.45 μm 或 0.2 μm 的滤膜过滤。 Sepax AAA 键合固定相的性质为非极性，推荐流动相为有机 试剂与水的混合物（如甲醇或乙腈的水溶液等）。流动相在 使用前需要脱气。一个简单的脱气方法是将流动相在水泵形成的真空下超声 5 min。当 Sepax AAA 柱用于梯度洗脱 时，起始流动相通常为 5%甲醇（或乙腈）。

色谱柱的保护

pH 避免在 pH 低于 2 或高于 11 的条件下使用 Sepax AAA 柱。较高的 pH 会溶解硅胶，从而使部分或全部的烷基 链从硅胶表面脱落，引起分离效率的 。为了获得最佳的分离效果和延长柱的使用寿命，请尽量 使用 pH 在 3 - 7.5 范围内的流动相。

压力 尽管 Sepax AAA 柱可在高至 5000psi 的压力下使 用，但正常的操作压力应当低于 3000psi。长时间在高压下运 行会损坏色谱柱。由于压力来源于流速，因此最大 流速将受制于系统所能承受的压力。一般而言，柱压会随着 色谱柱使用时间的增加而逐渐增加。压力突然增加预示色谱柱入口端的筛板发生了堵塞。在这种情况下，建议将色谱柱 反接后用适宜的溶剂进行冲洗。

温度

最高操作温度为 60o C。长时间在高温(>75o C)下操作 也会损坏色谱柱，这种情形在高的pH (>8)条件下特别突出。

储藏 长期不用时，请不要让水或缓冲液存留在色谱柱 中。在替代缓冲液时，请用至少 20-30 倍柱体积的 50%甲醇 （或乙腈）水溶液冲洗色谱柱，再用 20-30 倍柱体积的纯有机溶剂如已睛进行冲洗。每根色谱柱在运输过程中均会附有 两个可拆卸的堵头。为了防止柱床干涸，请用堵头塞紧色谱柱的两端。